PCR（聚合酶链式反应）是一项用于在体外快速扩增特定DNA片段的关键技术。其基本原理是通过模拟DNA自然复制的过程，利用DNA聚合酶在体外对目标DNA进行高效扩增。

PCR反应原理

PCR的基本原理基于DNA的变性、退火和延伸三个步骤的循环。这三个步骤构成一个完整的循环，每完成一次，DNA的数量便会翻倍。经过多次循环，便可以获得大量的目标DNA片段。

建立稳定的PCR反应条件

要建立一个成熟且稳定的PCR反应，需要考虑以下几个条件：

• 完整且纯净的模板（通过胶图和纳米滴测量进行评价）
• 高特异、高品质的引物（通过引物设计软件评分）
• 适宜的反应体系组合（考虑模板的GC比，是否需要添加DMSO或甜菜碱，和高保真或高得率所需的镁离子浓度）
• 合理的扩增反应程序（在引物Tm值附近进行多次实验，以寻找最佳退火温度）

PCR仪器的重要性

确定合理的扩增反应程序与PCR仪器的性能息息相关。如果PCR仪器具备温度梯度功能，用户可以设置不同的温度梯度，快速确定最佳退火温度，从而减少实验次数。

尊龙凯时PCR仪的优势

尊龙凯时的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）具备多种温度梯度功能，助力您的PCR实验：

• 常规梯度：单向设定低值和高值的退火温度范围，中间孔位则逐渐变化，但之间不一定呈等差分布。
• 线性梯度：可设定一个中间温度，并根据温差扩散到相邻孔位，方便验证感兴趣的整数温度。
• 二维梯度：在反应模块中，可以同时设置常规和线性梯度，从而实现最佳变性/退火温度的探索。

二维梯度PCR的优势

二维梯度PCR方法提供了多项优势：

• 提高PCR反应的特异性，减少非特异性杂交产物的产生。
• 优化各分子靶点，提高PCR产物纯度。
• 能够检测基因点突变和种群间遗传多样性，为生物医学研究提供便利。
• 操作简便，仅需配置一个反应体系即可。
• 增强阳性检测的准确性，降低假阳性的发生概率。
• 有效缩短实验时间，快速优化反应条件。

独立温区设计

此外，独立6温区的设置，让相邻温区可设置温差不超过5℃，并提供16孔的复孔位选择。这一设计是线性梯度的升级版，提高了实验的灵活性和准确性。而且，尊龙凯时的PCR仪均采用前进风后出风的散热模式，使得在多台仪器并排使用时，互不影响，确保温控的准确性。