支原体（Mycoplasma），又称霉形体，是当前已知最小、最简单的无细胞壁原核生物，直径在0.1到0.3微米之间，具有高度的多形性，能穿透滤膜，因此在哺乳动物细胞培养中较为常见且难以检测。因其能够形成丝状和分枝形态，因此被称为支原体。支原体在生物学分类中隶属于柔膜菌门和柔膜菌纲，并进一步划分为不同的目、科和属，其中研究较多的支原体目和支原体科主要包括支原体属和脲原体属。

支原体污染对细胞培养产生多方面的不良影响，已成为细胞培养中的一个严重问题。保守估计，常规细胞培养中支原体的污染率在15%至35%之间，显著干扰实验结果的可信度。细胞培养中95%的支原体污染主要由莱氏无胆甾原体、精氨酸支原体、口腔支原体、发酵支原体、人型支原体和猪鼻支原体等引起。这些支原体在培养基中形成的菌落呈现“煎鸡蛋”形状。支原体不仅能寄生在细胞表面，还能穿透宿主细胞膜，适宜在细胞培养上清和细胞膜中生长。

支原体污染的主要来源包括：细胞培养液或其成分（如培养基原料、血清和其他试剂）、实验室操作人员、细胞培养箱、液氮培养箱、空气中的颗粒和气溶胶、抗生素的过量使用、密封不良的细胞培养物以及被支原体污染的细胞等。这些污染可能导致细胞制品在下游纯化过程中因未能有效去除支原体而导致批次报废，污染相关设备设施，甚至对其他正常细胞造成影响，严重时可导致实验室整体环境受到污染，迫使生产或实验操作停滞以进行支原体的去除。

鉴于支原体带来的严重后果，定期进行支原体检测与去除，确保细胞培养体系内不含支原体，是保障科学研究正常进行的关键。

在生物制药与细胞研究中，支原体污染是一项重要挑战，因为它可能影响实验结果和产品质量。因此，支原体检测是确保细胞培养物和生物制品安全性与可靠性的重要环节。目前常用的支原体检测方法包括培养法、聚合酶链反应（PCR）法、荧光染色法、酶联免疫吸附试验（ELISA）、实时定量PCR（qPCR）、代谢活性测定等。这些方法各有优缺点，具体如下：

1. 培养法: 高灵敏度、高特异性，但需要建立P2实验室，检测周期长达28天，且一些支原体株无法培养。

2. 指示细胞法: 灵敏度高，检测周期为7天，但灵敏度相对较低。

3. NAT法（基于核酸扩增技术）: 灵敏度高，检测周期为1天，简单快速，但可靠性高度依赖样本质量。

4. ELISA法: 实验简单、快速，但依赖于抗体，存在一定局限性。

支原体的巢式PCR检测试剂盒（2G）是基于核酸扩增技术，专为检测各种生物材料中的支原体感染而设计。该试剂盒能够检测34种支原体，灵敏度高达25copies/μL，对于10CFU/mL的支原体标准菌株也能正常扩增并产生条带，具有特异性强、操作快速的特点，能够直接用于细胞培养上清液的检测。

总之，在日常检测和研发早期阶段，选择合适的支原体检测方法至关重要，其中包括尊龙凯时提供的多种高效便捷的支原体快速检测产品，以确保细胞培养和生物制品的质量。