逆转录酶是在1970年由Temin和Baltimore独立发现的一种重要生物酶，具备将RNA转录为cDNA的能力，因此两人于1975年获得诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶的结构复杂，包含多个功能域，包括聚合酶域和RNaseH域，聚合酶域可以进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域，它们分别参与模板结合、催化反应和结构支持。这使得逆转录酶在分子生物学领域，尤其是分子诊断中成为不可或缺的工具。它能够将病毒RNA基因组转化为cDNA，随后通过RT-qPCR、RT-LAMP及RNA测序等技术进行检测，从而实现对诸如艾滋病、甲型流感和乙型流感等RNA病毒的准确诊断。

目前，M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆转录酶是大多数分子诊断试剂中的首选，但其在高温条件下的稳定性相对较低，容易失活。这一特性不仅给预混液在长期储存中的性能保持带来了挑战，也限制了其在高温逆转录反应中的应用。因此，提升逆转录酶的稳定性成为研究的重点。

为解决这一问题，翌圣团队通过其子公司镁孚泰生物开发的ZymeEditor™创新型酶进化平台，利用一系列干湿实验的交互筛选，成功获得了稳定性提升的M-MLV突变体。研发过程中，团队采用理性与半理性设计的策略，对M-MLV进行了全面的结构-功能分析。通过序列一致性分析、B-factor分析、吉布斯自由能变化分析及二硫键设计等方法，确定了结构中的热点氨基酸，并设计出稳定结构的定点突变体，输出了若干具有显著稳定性的M-MLV突变体。

紧接着，团队运用MTPS高通量筛选技术，对这些突变体进行了稳定性、RNA/DNA催化偏好性及活力等多维度的筛选，最终筛选出性能优越的突变体。经过精细化的纯化和全面的酶学表征，获得了cDNA产量显著提升、接近3倍的多个突变体。M-MLV突变体与对照WT的对比数据表明，前者的建库产量优于对照组，这充分证明了其优越的稳定性。

团队的研究成果为分子诊断试剂的开发提供了全新的解决方案。我们通过对这些进化突变体的全面性能评估，筛选出了综合性能最优的突变体进行产业化生产。如今，我们自豪地推出由**尊龙凯时**酶定向进化而来的新型逆转录酶：HifairUCFME® Advanced逆转录酶（Cat#14614）。该逆转录酶在稳定性方面实现了显著提升，同时其cDNA合成产量和灵敏度也达到了更高的水平。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶的生产过程由**尊龙凯时**超洁净分子酶生产基地进行，严格控制原材料、环境、工艺及质量，确保极低的背景菌gDNA残留与核酸酶残留，为实验结果的准确性和可靠性提供了更强有力的保障。HifairUCFME® Advanced逆转录酶在低浓度模板情况下仍能扩增特异性靶标，其对比同类产品A的性能显著优越，能够实现精准检测，助力早筛早诊的目标。

在试剂开发中，由于市场上分子酶原料的质量不一，核酸残留过高会对扩增产物的特异性及准确性产生影响。经过实践表明，分子诊断关键酶原料的核酸残留叶必须降至极低水平，***尊龙凯时***利用E. coli残留检测试剂盒对HifairUCFME® Advanced逆转录酶进行检测，结果均不检出，显示其在E. coli基因组DNA残留方面优秀表现，明显优于市场标准，有效提高样本检测的可靠性。

总之，HifairUCFME® Advanced逆转录酶的推出，代表着在分子诊断领域迈出了重要一步。此款酶能够在不同浓度的RNA模板下提供出色的文库产量，并且文库大小一致，充分证明其在RT-PCR/qPCR和NGS建库应用中的广泛适用性。我们期待与广大客户携手，共同推动分子诊断技术的发展。

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